產品介紹
概述
硝基呋喃類藥物是一種抗生素，對大多數革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌等病原體均有殺滅作用。硝基呋喃類藥物因為價格較低且效果好，被廣泛應用于畜禽及水產養(yǎng)殖業(yè)，以治療由大腸桿菌或沙門氏菌所引起的腸炎、疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等。由于硝基呋喃類藥物及其代謝物對人體有致癌、致畸胎的副作用，中華人民共和國農業(yè)部將硝基呋喃類藥物列為在飼養(yǎng)過程中禁止使用的藥物，在動物性食品中不得檢出。硝基呋喃類原型藥在生物體內代謝迅速，其代謝產物分別為AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和蛋白質結合而相當穩(wěn)定，故常利用代謝物的檢測來反應硝基呋喃類藥物的殘留狀況。
本試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)的藥物殘留檢測產品，與儀器分析技術相比具有快速、簡便、靈敏度高等優(yōu)點，能減少工作強度。
檢測步驟
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液【配液1】在使用前也需回溫。
4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本：加標準品或樣本50μL/孔到對應的微孔中，再加入呋喃西林代謝物酶標物50μL/孔，然后再加入呋喃西林代謝物抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液【配液1】250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應15min。
8、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內讀完數據），測定每孔OD值(若無酶標儀，則不加終止液用目測法可進行判定)。
注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒及里面的試劑，否則可能會引起靈敏度的降低。
6、儲存條件
保存試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為15min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到20min，但不得超過20min。反之，則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液（10×）如有結晶屬正常現象，請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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