產品介紹
概述
概要?
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DeoxynivaLenoL）又稱嘔吐毒素 （Vomitoxin）屬于霉菌的單端孢菌素族，由某些鐮刀霉真菌屬產生。嘔吐毒素多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實樣本中，由于其具有強的細胞毒性及免疫抑制性質，對人類及動物的健康構成威脅。?
本試劑盒是應用ELISA最新技術研發而成的毒素檢測產品，與儀器分析技術相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優點，操作時間需20min，能減少工作強度和操作誤差。?
實驗原理?
本試劑盒采用間接競爭ELISA 方法，在酶標板微孔上預包被嘔吐毒素抗原，樣本中的嘔吐毒素和微孔上預包被的抗 原競爭嘔吐毒素抗體（抗試劑），同時嘔吐毒素抗體與酶標二抗（酶標物）相結合，經TMB 底物顯色，樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量呈負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的校準系數，即可得出樣本中嘔吐毒素的含量。?
貯藏條件及有效期?
貯藏條件：保存試劑盒于 2~8℃。?
有效期：該產品有效期為 12 個月。
檢測步驟
1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20~25℃）平 衡 1h 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃。切 勿冷凍。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。?
4、請注意反應溫度不宜過高，控制溫度在 20~25℃。?
5、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標 準品做 2 孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置（建 議在一次實驗過程中，若使用 8 道移液器則標準品和樣本 的總量不宜超過 48 個，即不宜超過 6 個檢測條；建議若 使用單道移液器則不宜超過 16 個，即不宜超過 2 個檢測 條）。?
6、加標準品/樣本：加入標準品或樣本 50μL 到對應的微孔中， 加酶標物 50μL /孔，再加入抗試劑 50μL /孔（加抗試劑時 請使用多道移液器），輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環境中反應 15min。?
7、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液 250μL /孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔 10s，在吸水紙上拍干（拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。?
8、顯色：加入底物液 100μL /孔（加底物液時請使用多道移 液器），用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環境反應 5min。?
9、測定：加入終止液 50μL /孔（加終止液時請使用多道移液 器），輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于 450nm 處（建議用 雙波長 450/630nm 檢測，請在 5min 內讀完數據），測定 每孔 OD 值。
注意事項
1. 試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的 OD 值偏低。
2. 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲 線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即 進行下一步操作。
3. 每加一種試劑前需將其搖勻。
4. 反應終止液為 2M 硫酸，避免接觸皮膚。
5. 不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期 的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會 引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試 劑。
6.儲存條件:保存試劑盒于 2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板 放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7. 試劑變質的跡象:發色試劑有任何顏色表明發色劑變質，應當棄之。0 標準 的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5）時，表示 試劑可能變質。
8. 加入底物液后，一般顯色時間為 5min。若顏色較淺，可延長反應時間到 7min。反之，則減短反應時間。
9. 濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象，請加熱溶解后使用。
10. 該方法為篩選方法，如遇陽性樣本請用確證方法確認。
11. 該試劑盒最佳反應溫度為 25℃，溫度過高或過低將導致 檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
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