產(chǎn)品介紹
概述
用途
維生素B12免疫親和柱可特異性選擇吸附樣品液中的VB12，從而對(duì)基質(zhì)復(fù)雜的樣品中的VB12起到針對(duì)性的凈化作用，過(guò)柱凈化后的樣品可直接用于HPLC或LC-MS分析。親和柱與HPLC或LC-MS配合使用可達(dá)到快速測(cè)定的目的，以改善信噪比，可提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度。
概述
VB12，別名氰鈷胺素、抗惡性貧血維生素等，是一種重要的B族維生素，攝取不足可能引起惡性貧血、精神不振等疾病。
原理
測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原與抗體反應(yīng)，抗體連接在柱體內(nèi)，樣品經(jīng)過(guò)提取、離心、過(guò)濾，緩慢的通過(guò)VB12免疫親和柱，在免疫親和柱內(nèi)VB12與抗體結(jié)合，之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結(jié)合的其他雜質(zhì)。用甲醇洗脫VB12，經(jīng)氮?dú)獯蹈蓮?fù)溶后注入到分析儀器中檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
1.使用前，免疫親和柱需回至室溫（22～25°C）。
2.親和柱2～8°C儲(chǔ)存，不得凍存。-
3.不要使用過(guò)了有效日期的免疫親和柱。
4.取樣量：根據(jù)需要可以適當(dāng)增加或減少取樣量，注意提取液量要相應(yīng)改變。
5.柱容量：1000ng，當(dāng)樣本中待檢VB12的含量除以稀釋倍數(shù)高于柱容量時(shí)，需要適當(dāng)降低上樣液的體積，重新檢測(cè)。
6.pH：親和柱的上樣溶液pH需在6～8之間，若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
7.在重力作用下過(guò)柱或用氣控操作架控制流速為1.5-2mL/min。
8.上機(jī)檢測(cè)時(shí)的溶劑與流動(dòng)相一致可消除溶劑效應(yīng)的影響。
9.氰化鉀有毒，操作時(shí)要穿防護(hù)服、戴長(zhǎng)筒膠皮手套、護(hù)目鏡、口罩和帽子。氰化鉀遇酸會(huì)釋放劇毒氣體氫氰酸，反應(yīng)完的廢液中可加入次氯酸鈉溶液，處理后再排放；所有接觸過(guò)的器皿、手套建議用4%次氯酸鈉浸泡處理。此溶液中可以適當(dāng)加些氫氧化鈉，保證溶液的堿性環(huán)境，24小時(shí)后，用氰基檢測(cè)試紙檢查。
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