產品介紹
概述
本試劑盒是應用ELISA技術研發而成的檢測產品，與儀器分析技術相比，具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優點，操作時間為45min，能減少操作誤差和工作強度。
試驗原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被四環素類藥物抗原，樣本殘留的四環素類藥物和微孔條上預包被的抗原競爭抗四環素類藥物抗體（抗試劑），加入酶標二抗（酶標物），經TMB底物顯色，樣本吸光度值與其殘留物四環素類藥物呈負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中四環素類藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測蜂蜜、牛奶中四環素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環素類藥物的含量。
檢測步驟
1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20~25°C）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試劑中有晶體析出，回溫溶解后方可使用。
2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔放入錫箔袋，保存于2~8°C。切勿冷凍。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本：加標準品/樣本100μL到對應的微孔中，再加入四環素類酶標物50μL/孔，再加入四環素類抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境反應15min。
8、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內讀完數據），測定每孔OD值。
結果判定
請利用試劑盒專業分析軟件進行計算，更便于大量樣本的準確、快速分析（歡迎來電索取）。
注意事項
1、室溫低于20°C或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25°C）會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件保存試劑盒于2～8°C，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發色試劑有任何顏色表明發色劑變質，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為15min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到20min，但不得超過20min。反之，則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象，請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25°C，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
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